製品詳細

Anewex RNA cleanup kitは事前に精製（フェノール/クロロホルムによる）されたRNAに含まれる酵素反応物質（増幅または標識反応物質、DNase消化酵素など）を、簡単で迅速な方法で除去します。

・高品質の total RNA精製がわずか数分で可能

・あらゆるダウンストリームアプリケーションで高性能を実現する ready-to-use RNA

・フェノール/クロロホルム抽出、CsClグラジエント、LiCl、エタノール沈殿は行いません

・ RT-PCR阻害剤の完全な除去

適用

Anewexの技術で分離されたRNAはA260 / 280比：1.9〜2.1、A260 / 230：　であり、あらゆるダウンストリームアッセイに適用できます。

• RNA-seq
• Quantitative, real-time RT-PCR
• End-point RT-PCR
• Northern, dot, and slot blotting
• Array analysis
• Poly A + RNA selection

プロトコール

1. 1.5mLチューブにRNAを用意し、2倍量のRCBを添加（例：RNA50μLに対しRCB 100µL）する。
2. よく混合し、 ２ｍL collection tubeにセットされたRNA cleanup スピンカラムに移す
3. ふたをやさしく閉じ、10,000rpm以上で15秒遠心し、落下液を捨てる。
4. 300μLのRCW１をスピンカラムにのせる。
5. ふたをやさしく閉じ、10,000rpm以上で15秒遠心し、落下液を捨てる。
6. 500μLのRCW２をスピンカラムにのせる。
7. ふたをやさしく閉じ、10,000rpm以上で15秒遠心し、落下液を捨てる。
8. 新しい1.5mLコレクションチューブにRNA cleanup スピンカラムをセットする。スピンカラムメンブレンの中央に RNase-free water 15mLをのせる。
9. やさしくふたを閉じ、最高速度で1分間遠心しRNAを溶出する。RNase-free water 10μL未満では溶出しないでください

データと数値のサポート

リアルタイムRT-PCRやRN​​A-Seqなどのアプリケーションの効率は、使用するRNAサンプルの純度に大きく依存します。 RNAの純度を評価するために、260nmでのRNAの吸光度と280nmまたは230nmでの潜在的な汚染物質の吸光度を分光測定（例：Nanodrop）で測定しました。 高純度のRNAの指標としてはpH7.5でA260 / A280比1.8～2.1の値が広く受け入れられています。また、 A260 / A230比が2.0付近またはわずかに高い値となります。抽出されたRNAにAnewexRNAクリーンアップキットを使用した際のA280 / A260およびA230 / A260は、A280 / A260では1.7から1.96に、A280 / A260では0.65から2.17に大幅に改善されました。

Fig. 1: グアニジンチオシアン酸塩/フェノール/クロロホルムを使用して高脂肪食肝臓組織から抽出されたRNAの品質は、NanoDrop によって測定されました。

Fig. 2: Anewex RNA クリーンアップキットを使用してクリーンアップされたRNAの品質は、NanoDrop によって測定されました。